文献类型： 中文期刊

作者： 王梦璐 ¹ ; 张志杰 ² ; 李之晗 ² ; 聂晶晶 ² ; 瞿云芝 ² ; 张春红 ² ; 刘志成 ² ; 沈海燕 ² ; 张建峰 ² ; 孙亚妮 ³ ; 李玉谷 ¹ ;

作者机构： 1.华南农业大学兽医学院

2.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室

3.西北农林科技大学动物医学院

关键词： 干扰素刺激基因20;生物信息学分析;真核表达;猪流行性腹泻病毒

期刊名称： 动物医学进展

ISSN： 1007-5038

年卷期： 2024 年 45 卷 010 期

页码： 7-14

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究猪干扰素刺激基因20(interferon-stimulated gene 20,ISG20)的序列信息及其表达情况，并探讨其对猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)增殖的影响，以提取的猪小肠上皮细胞IPEC-J2总RNA为模板扩增猪ISG20基因的CDS区序列，并应用生物信息学进行分析，进而构建pcDNA3.1-3×Flag-ISG20重组质粒转染入IPEC-J2细胞鉴定表达情况。此外，在转染重组质粒的细胞中感染PEDV分析ISG20对PEDV增殖的影响。结果表明，猪ISG20基因CDS区的大小为516 bp,编码171个氨基酸，理论等电点(pI)为8.84;猪ISG20存在2个N-糖基化位点和23个磷酸化位点，主要定位于细胞骨架和细胞质中，以α-螺旋和无规则卷曲构成；构建的pcDNA3.1-3×Flag-ISG20重组质粒能够在IPEC-J2细胞中表达，蛋白大小约为19.6 ku,而且可以明显抑制PEDV的增殖；克隆了猪ISG20基因，并且在IPEC-J2细胞中重组质粒pcDNA3.1-3×Flag-ISG20能够表达且发挥抑制PEDV增殖的作用，研究结果为深入探讨PEDV与ISG20的相互作用，以及以此为靶点筛选抗PEDV生物制剂提供了思路。