文献类型： 中文期刊

作者： 沈海燕 ¹ ; 黄俊 ² ; 张琬玓 ³ ; 聂晶晶 ¹ ; 瞿云芝 ¹ ; 张建峰 ¹ ; 李智丽 ³ ; 张春红 ¹ ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室

2.广东广垦畜牧集团股份有限公司

3.佛山科学技术学院生命科学与工程学院

关键词： 猪流行性腹泻病毒(PEDV);流行病学;病理变化;组织切片;遗传进化分析;分离;鉴定

期刊名称： 黑龙江畜牧兽医

ISSN： 1004-7034

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 79-87

收录情况： 北大核心

摘要： 为了探明辽宁省沈阳市某猪场仔猪发生腹泻的病原及其遗传进化特征,试验首先对该猪场发生腹泻的仔猪腹腔进行剖检,记录小肠组织的病理变化;收集病理变化较明显的组织进行切片和H.E.染色,观察并记录结果;取病料后提取病毒核酸,用猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(Porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)、猪丁型冠状病毒(Porcine delta coronavirus,PDCoV)、猪轮状病毒(Porcine rotavirus,PRoV)和猪急性腹泻综合征冠状病毒(Swine acute diarrhea syndrome coronavirus,SADS-CoV)检测引物进行RT-PCR检测;然后进行病毒的分离、致细胞病变效应(CPE)观察、传代、间接免疫荧光试验与效价的测定;最后对病毒的关键基因进行PCR扩增及遗传进化分析.结果表明:腹泻仔猪小肠肠壁变薄、胀满、充满水样内容物,肠系膜呈树枝状充血,肠系膜淋巴结水肿;十二指肠肠绒毛破碎、细胞坏死,固有层细胞充血;空肠肠绒毛萎缩变短,上皮细胞空泡样变性,少量淋巴细胞浸润,与PEDV感染猪只的肠组织病理变化相同.腹泻仔猪病料组织PEDV核酸检测结果为阳性,其他 4 种病原检测结果均为阴性.将盲传6 代的病毒培养液接种于Vero细胞,培养48 h后出现明显的CPE,以PEDV N特异性单克隆抗体为一抗的间接免疫荧光试验出现特异性的绿色荧光,经测定病毒效价为 1×105.83 TCID50/mL.将分离毒株命名为CH/XF1.C.3/2020,其ORF3 基因和S基因与国内外PEDV参考株的相似性分别为 89.9%~99.6%和 92.7%~98.4%.该毒株与近年来分离的国内外的PEDV变异株亲缘关系较近,与经典毒株CV777(GenBank登录号为KT323979.1)的亲缘关系较远,属于 GⅡ/GⅡa型 PEDV.说明本试验成功分离到一株GⅡ/GⅡa型PEDV,该毒株为该猪场仔猪发生腹泻的病原.