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应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位

文献类型: 中文期刊

作者: 杨廷亚 1 ; 王芳 1 ; 姜平 2 ; 胡波 1 ; 范志宇 1 ; 魏后军 1 ; 薛家宾 1 ;

作者机构: 1.江苏省农业科学院兽医研究所

2.南京农业大学动物医学院

关键词: 兔出血症病毒;单克隆抗体;噬菌体展示技术;模拟表位

期刊名称: 畜牧兽医学报

ISSN: 0366-6964

年卷期: 2012 年 43 卷 08 期

页码: 1281-1286

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以抗兔出血症病毒(RHDV)的单克隆抗体A3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选RHDV抗原表位。将纯化的单抗A3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用ELISA测定后,提取阳性克隆单链DNA并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性。结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆;测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列GTDDMDPGTTAA,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序DXXDP为表位中的核心氨基酸;制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔RHDV高免血清也具有较好的反应性。因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性。该研究为RHDV抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料。

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