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兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 熊富强 1 ; 王芳 2 ; 范志宇 2 ; 恽时锋 2 ; 蔡少平 2 ; 林焱 2 ; 姜平 2 ;

作者机构: 1.南京军区南京总医院比较医学科

2.南京军区南京总医院比较医学科;江苏省农业科学院兽医研究所农业部动物疫病免疫与诊断重点开放实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心;南京农业大学动物医学院

关键词: 兔;支气管败血波氏杆菌;单克隆抗体

期刊名称: 中国比较医学杂志

ISSN: 1671-7856

年卷期: 2009 年 19 卷 11 期

页码: 23-26

摘要: 目的建立能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌(Bb)的单克隆抗体杂交瘤细胞株,为今后进一步建立该菌的免疫检测技术奠定基础。方法以Bb分离株BLJ05的灭活菌液为免疫原,腹腔免疫BALB/c小鼠,采用常规杂交瘤技术制备Bb单克隆抗体(McAb),用间接ELISA、Western-blot等方法对McAb特性进行鉴定。结果获得两株能稳定分泌抗Bb单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为A7D5和D6B2,其小鼠腹水抗体效价分别为1∶409600和1∶102400;且不与兔大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、产气荚膜梭菌等兔的常见病原菌反应,特异性强。两株单抗亲和力实验表明A7D5亲和力略高于D6B2。ELISA相加试验表明它们针对相同的抗原表位。结论成功建立了两株能稳定分泌抗兔支气管败血波氏杆菌单克隆抗体的杂交瘤细胞株,效价高、特异性强,为今后建立该菌的免疫检测技术建立奠定了基础。

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