文献类型： 中文期刊

作者： 令狐远凤 ¹ ; 潘永 ² ; 杨阳 ¹ ; 段世宇 ¹ ; 张家莉 ¹ ; 杨琦 ¹ ;

作者机构： 1.贵州大学动物科学学院

2.贵州省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 沙门氏菌;λ-Red同源重组系统;sRNA RybB;伴侣蛋白Hfq;OmpW

期刊名称： 中国家禽

ISSN： 1004-6364

年卷期： 2023 年 45 卷 006 期

页码： 30-35

收录情况： 北大核心

摘要： 为探究sRNA RybB和伴侣蛋白Hfq对沙门氏菌孔蛋白OmpW表达的调控作用,研究利用λ red同源重组系统构建ompW基因lacZ融合菌株,再通过P22噬菌体转导技术构建颜色指示菌株中rybB和hfq相关基因的单缺失株、双缺失株,通过β-半乳糖苷酶活性试验和qPCR分析,确定sRNA RybB及伴侣蛋白Hfq对孔蛋白OmpW表达的调控作用.结果显示:成功构建了颜色指示菌株ΔompW∶∶LacZ和相对应的基因缺失菌株;与标准株LT2相比,ΔhfqY25A、ΔhfqK56A、Δhfq65、Δhfq87基因使ompW蛋白表达水平极显著下调(P<0.01),具有正调控作用,而Δhfq72、Δhfq∶∶tet、ΔrybB、ΔrybBΔhfq∶∶tet基因使ompW蛋白表达水平极显著上调(P<0.01),具有负调控作用;与标准株LT2相比,缺失hfq定点突变和rybB对ompW基因具有负调控作用.研究表明,沙门氏菌伴侣蛋白Hfq及RybB对孔蛋白ompW基因的蛋白表达水平和转录水平产生不同程度的影响,初步阐明了伴侣蛋白Hfq、sRNA RybB和靶基因三者的内在关系,为沙门氏菌减毒活疫苗与新型抗菌药物研制的研究奠定基础.