文献类型： 中文期刊
作者： 于宗幸 1 ; 刘成倩 2 ; 李红 2 ; 范兴琼 1 ; 陈磊 1 ; 王静 1 ; 易建中 2 ;
作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院
2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所
关键词： 新城疫病毒;Lasota毒株;基因组全长cDNA;RT-PCR;重组质粒
期刊名称： 上海农业学报
ISSN： 1000-3924
年卷期： 2015 年 31 卷 02 期
页码： 22-25
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 将Lasota病毒RNA反转录为cDNA,按照GenBank上公布的Lasota基因组序列(AF 077761)设计了5对引物进行全基因组的扩增(RT-PCR),并将各个片段连于克隆载体pMD_(18)-T,获得高拷贝的基因序列,然后通过酶切连接将测序正确的各个片段连接到pET-30a载体。PCR分片段扩增、酶切鉴定及测序结果表明,所构建的Lasota全基因组cDNA基因序列正确,连入载体的位置与预期完全一致。
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