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不同体细胞类型和基因转染方式对绵羊克隆胚胎体外发育的影响

文献类型： 中文期刊

作者： 崔茂盛 1 ; 冯冲 2 ; 张金龙 1 ; 张效生 1 ; 李义海 1 ; 冯建忠 1 ;

作者机构： 1.天津市畜牧兽医研究所

2.中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

关键词： 绵羊;体细胞;基因转染;克隆

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2012 年 44 卷 01 期

页码： 57-60

收录情况： 北大核心

摘要： 首先获得绵羊胎儿成纤维细胞、成年耳组织成纤维细胞及前脂肪细胞,用脂质体介导法、BTX电转法及Nucleofector核转法对上述细胞系转染绿色荧光蛋白(gfp)基因,并对转染效率进行比较,最后探讨3种转gfp基因细胞对绵羊转基克隆胚发育的影响。结果:核转法的转基因效率最高,3种细胞的转基因效率分别为86%,87%和90%,显著高于BTX电转法和脂质体法基因转染效率;脂质体转染效率显著低于BTX电转效率(P<0.05)。而对同一种转染方法而言,基因转染效率在3种细胞间差异均不显著(P>0.05)。在以上述3种转基因细胞为核供体的转基因克隆试验中,胚胎融合率、卵裂率均无显著性差异(P>0.05),胎儿成纤维细胞组的囊胚率显著高于前脂肪细胞组(P<0.05),但耳组织成纤维细胞组与胎儿成纤维细胞、前脂肪细胞间差异均不显著(P>0.05)。结果表明核转法基因转染效率最高,胎儿成纤维细胞最适合于胚胎克隆研究。

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