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蚕豆SSR-PCR体系建立及优化

文献类型： 中文期刊

作者： 沙伟超 1 ; 侯万伟 1 ; 刘玉皎 1 ; 田莹莹 1 ; 武学霞 1 ;

作者机构： 1.青海大学;青海大学农林科学院;三江源生态与高原农牧业国家重点实验室

关键词： 蚕豆;SSR-PCR;体系优化

期刊名称： 青海大学学报

ISSN： 1006-8996

年卷期： 2017 年 02 期

页码： 13-18+27

摘要： 为了建立适宜蚕豆的SSR-PCR反应体系,用于蚕豆的SSR分子标记研究。以青海12号、透心绿为材料,通过正交设计L16(45)对蚕豆SSR-PCR反应体系中的Taq酶,Mg~(2+),dNTPs,引物和模板DNA 5个因素的4个水平进行优化试验。结果表明:各因素不同水平对PCR反应均有影响,各因素对PCR扩增结果的影响大小分别为:Taq酶>dNTPs>模板DNA>引物>Mg2+。最终筛选出蚕豆最佳SSR-PCR反应体系(20μL):1U Taq酶,0.75 mmol/L d NTPs,100 ng模板DNA,2μmol/L引物和1.5 mmol/L Mg~(2+)。

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