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用蔗糖密度梯度离心法提纯禽脑脊髓炎病毒

文献类型: 中文期刊

作者: 韦莉 1 ; 刘爵 1 ; 张杰 1 ; 张方亮 1 ; 姚炜光 1 ; 周蛟 1 ;

作者机构: 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所

关键词: 禽脑脊髓炎病毒;蔗糖密度梯度;提纯

期刊名称: 北京农业科学

ISSN: 1001-8344

年卷期: 1999 年 17 卷 06 期

页码: 36-37

摘要: 用蔗糖密度梯度离心法进行了禽脑脊髓炎病毒的纯化。将禽脑脊髓炎病毒( AEV)L2Z 株、Van Roekel 株和1143 株分别经卵黄囊接种6 日龄SPF 鸡胚,接毒后13 天,收集脑、消化道及胰腺,用玻璃匀浆器制成10 % 的组织悬液。组织悬液经3 次反复冻融后,以4500r/min 离心15 min ,取上清液。而后用氯仿处理,取水相,经冷冻真空浓缩,进行不连续蔗糖密度梯度离心。取出含AEV 的组分,用PBS 稀释后超速离心除去蔗糖,得到提纯的病毒。病毒样品经2 % 磷钨酸负染,于电镜下观察可见典型的病毒粒子,大小为24 ~28n m 。

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[1]禽脑脊髓炎病毒在BGM-70传代细胞系上培养特性的初步研究. 刘爵,张杰,刘有昌,张方亮,周蛟. 1999

[2]禽脑脊髓炎病毒不同批次毒种致病性的研究. 章振华,姜北宇,李林,张建伟,景小冬,毛娅卿,郑小兰. 2009

[3]鸡红细胞提纯禽流感病毒试验. 步卫东,刘月焕. 2006

[4]禽脑脊髓炎病毒VP0基因的克隆与序列测定. 韦莉,刘爵,张方亮,曹永长. 2000

[5]昆虫杆状病毒表达禽脑脊髓炎病毒VP1蛋白. 韦莉,刘爵,余锐萍,姚炜光,周蛟,王菁,施蕾. 2006

[6]核酸探针检测禽脑脊髓炎病毒方法的建立和应用. 韦莉,刘爵,姚炜光,张方亮,王平,周蛟. 2004

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