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黏质沙雷氏菌C8-8几丁质酶基因的克隆与表达

文献类型： 中文期刊

作者： 刘邮洲 1 ; 罗楚平 1 ; 刘永锋 1 ; 陈志谊 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院植物保护研究所

关键词： 黏质沙雷氏菌;chiA基因;克隆;表达

期刊名称： 江苏农业学报

ISSN： 1000-4440

年卷期： 2012 年 28 卷 03 期

页码： 32-36

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 利用PCR方法从黏质沙雷氏菌(Serratia marcescens)C8-8中克隆到编码几丁质酶的chiA基因,大小为1 692 bp,推测其编码一条长563个氨基酸的多肽链,分子量约为60 900。同源分析研究结果表明从C8-8中克隆的chiA基因序列与黏质沙雷氏菌株141(DQ 990373.1)和14041菌株(DQ 493896.1)的chiA基因序列相似性最高,达到99%。结构域分析结果表明从C8-8中克隆的chiA基因N末端(23 AA)存在典型的信号肽序列,C端存在另外两个结构域,即PKD区(73 AA)和几丁质酶催化区(387 AA)。采用大肠杆菌表达系统重组表达chiA基因,结果表明重组菌株在几丁质诱导培养基上能产生透明的水解圈。采用SDS-PAGE电泳分析,结果表明chiA重组表达产物的相对分子质量约为60 000,与预测分子量大小基本一致。初步提纯后,生物活性试验结果表明该重组表达产物能水解几丁质,在几丁质培养基上产生透明的水解圈。

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