文献类型： 中文期刊
作者： 李敏 1 ; 向华 2 ; 宣华 2 ; 蔡建平 2 ; 王贵平 2 ;
作者机构： 1.军事医学科学院实验动物中心
2.广东省农业科学院兽医研究所
关键词： 猪流感病毒;H3N2;NS1;原核表达
期刊名称： 广东畜牧兽医科技
ISSN： 1005-8567
年卷期： 2009 年 34 卷 02 期
页码： 31-34
摘要： 对H3N2亚型猪流感病毒NS1基因进行原核表达,获得纯化表达产物,以期为检测猪流感抗体的ELISA试剂盒的研制奠定基础。采用RT-PCR方法扩增H3N2亚型猪源流感病毒的NS1基因(693bp),并将该片段克隆至pET-28(a)构建重组表达质粒pET-NS1。将重组质粒转化E.coliBL21(DE3)感受态细胞,以终浓度1mmol/L的IPTG在不同时间进行诱导表达,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,并经Western-blot分析表达产物的抗原性。pET-NS1重组表达质粒表达的NS1蛋白相对分子质量约为26kD,1mmol/L的IPTG诱导4h时蛋白表达量达到高峰。Western-blot印迹分析证实表达蛋白能与阳性血清发生特异性反应,而与阴性血清不反应。NS1基因的原核表达产物可用来鉴别流感感染猪群和灭活疫苗免疫猪群。
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