您好，欢迎访问广东省农业科学院 机构知识库！
广东省农业科学院机构知识库

全部

  • 全部
  • 标题
  • 学者
  • 机构
  • 关键词

猪流行性腹泻病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 李艳 1 ; 卞志标 1 ; 翟少伦 1 ; 李春玲 1 ;

作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站

关键词： 猪流行性腹泻病毒;M基因;LNA-TaqMan探针荧光定量PCR

期刊名称： 广东畜牧兽医科技

ISSN： 1005-8567

年卷期： 2024 年 002 期

页码： 30-36

摘要： 为建立一种快速、灵敏的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）早期痕量检测方法，该研究以PEDV的M基因为靶基因，设计了特异性引物和锁核酸（Locked Nucleic Acid,LNA）-TaqMan探针，经过条件优化，建立了基于LNA-TaqMan探针的PEDV荧光定量PCR方法，并与常规TaqMan探针法进行了比对。结果显示，所建立的PEDV的LNA-TaqMan探针荧光定量PCR方法最低检测限为3.2拷贝/微升，较常规TaqMan探针法提高了10倍；与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪德尔塔冠状病毒等多种病原不存在交叉反应，特异性良好；批内和批间重复性结果的变异系数均小于1%，重复性较好。应用该方法对103份临床样品进行检测，结果显示，共检出PEDV阳性样品47份，阳性率45.63%，与常规TaqMan探针法检测结果的阳性符合率为90.38%。本研究建立的基于LNA-TaqMan探针的荧光定量PCR方法为PEDV的精准检测和流行病学调查提供了一种新的技术选择。

  • 相关文献

[1]非洲猪瘟病毒锁核酸探针荧光定量PCR检测方法的建立. 李艳,郭怡德,勾红潮,卞志标,孙铭飞,蔡汝健,宋帅,蒋智勇,楚品品,徐民生,杨东霞,李春玲. 2021

[2]NA-1株鹅源副粘病毒M、F和HN蛋白基因的真核表达. 马爱霞,袁洁,丁壮,宣华,宋子运,徐明. 2008

[3]PRRSV缺失变异毒株JL/07/SWM基因克隆与原核表达. 丁壮,彭龙,宣华,王贵平. 2009

[4]猪流行性腹泻病毒变异株GDqy2017的分离及S和ORF3基因序列分析. 楚品品,蒋智勇,林德锐,徐志宏,李艳,勾红潮,卞志标,李春玲,蔡汝健. 2018

[5]猪流行性腹泻病毒在稳定表达猪ACE2基因的IPEC-J2细胞中的增殖研究. 沈海燕,康桦华,刘志成,张建峰,张春红. 2020

[6]华南地区猪流行性腹泻病毒的分子流行病学调查与分析. 王栓群,孙瑞芹,刘燕玲,夏平安,宋长绪. 2015

[7]2021年广东省猪流行性腹泻病毒分子监测和部分S基因序列分析. 陈胜男,胡柱祺,林金森,邵洋洋,钟汝情,张杰,谢莹,焦思思,欧阳慧敏,卢嘉贤,许伟锋,邹育根,张建峰,翟少伦. 2022

[8]适合猪流行性腹泻病毒敏感复制的Vero细胞株的克隆及应用. 蒋智勇,蔡汝健,刘燕玲,张乐宜,李艳,宋长绪. 2015

作者其他论文 更多>>
置顶
购物车
反馈

© 京ICP备09089781号-29 主办单位：广东省农业科学院

学术资源： 中国农业科学院 农业专业知识服务系统 农科联盟资源共建共享平台 中国农业科技文献与信息服务平台 中国农业期刊集成服务平台