文献类型： 中文期刊
作者： 李艳 1 ; 卞志标 1 ; 翟少伦 1 ; 李春玲 1 ;
作者机构： 1.广东省农业科学院动物卫生研究所/广东省畜禽疫病防治研究重点实验室/农业农村部兽用药物与诊断技术广东科学观测实验站
关键词： 猪流行性腹泻病毒;M基因;LNA-TaqMan探针荧光定量PCR
期刊名称： 广东畜牧兽医科技
ISSN： 1005-8567
年卷期： 2024 年 002 期
页码： 30-36
摘要： 为建立一种快速、灵敏的猪流行性腹泻病毒（porcine epidemic diarrhea virus, PEDV）早期痕量检测方法，该研究以PEDV的M基因为靶基因，设计了特异性引物和锁核酸（Locked Nucleic Acid,LNA）-TaqMan探针，经过条件优化，建立了基于LNA-TaqMan探针的PEDV荧光定量PCR方法，并与常规TaqMan探针法进行了比对。结果显示，所建立的PEDV的LNA-TaqMan探针荧光定量PCR方法最低检测限为3.2拷贝/微升，较常规TaqMan探针法提高了10倍；与猪传染性胃肠炎病毒、猪轮状病毒和猪德尔塔冠状病毒等多种病原不存在交叉反应，特异性良好；批内和批间重复性结果的变异系数均小于1%，重复性较好。应用该方法对103份临床样品进行检测，结果显示，共检出PEDV阳性样品47份，阳性率45.63%，与常规TaqMan探针法检测结果的阳性符合率为90.38%。本研究建立的基于LNA-TaqMan探针的荧光定量PCR方法为PEDV的精准检测和流行病学调查提供了一种新的技术选择。
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