文献类型： 中文期刊

作者： 张奇文 ¹ ; 凌晨 ¹ ; 马勋 ¹ ; 薄新文 ¹ ; 杜冬冬 ¹ ; 钱凌霄 ¹ ; 李红欢 ¹ ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院;新疆天康畜牧生物技术股份有限公司;省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室/新疆农垦科学院

关键词： 单增李斯特菌;lmo0160基因;缺失株;同源重组;生物膜

期刊名称： 石河子大学学报(自然科学版)

ISSN： 1007-7383

年卷期： 2017 年 06 期

页码： 707-713

摘要： 为了研究致绵羊脑炎单增李斯特菌新疆分离株LM90SB2的LPXTG基序蛋白lmo0160基因对生物膜形成能力的影响,本研究利用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)及同源重组技术,使用穿梭质粒p KSV7载体,构建lmo0160基因缺失株LM90SB2-lmo0160。通过测定OD_(600)绘制生长曲线,利用结晶紫染色测定OD_(570)定量检测生物膜形成能力,在显微镜下观察生物膜的形态。结果显示:与LM90SB2菌株相比,LM90SB2-Δlmo0160在37℃培养条件下生长速度显著降低(P<0.01)。LM90SB2和LM90SB2-Δlmo0160在不同时间点均形成网格结构的生物膜,但生物膜的致密度和OD_(570)有不同。显微镜下LM90SB2-Δlmo0160形成松散,稀薄的生物膜,LM90SB2生物膜致密,浓厚。不同时间点LM90SB2-Δlmo0160 OD_(570)值均小于LM90SB2,8和12 h差异不显著(P>0.05);24 h差异显著,(P24 h<0.05);48 h差异极显著(P48 h<0.001)。本研究表明,Δlmo0160基因对LM90SB2生长增殖和生物膜形成具有一定的影响作用,这为进一步阐明LM毒力因子的致病机制提供理论依据。