文献类型: 中文期刊
作者: 邢云瑞 1 ; 孙亚宁 1 ; 胡骁飞 1 ; 范璐 1 ; 陈琳琳 2 ; 张改平 1 ;
作者机构: 1.河南省农业科学院动物疫病防控研究所(河南省农业科学院动物免疫学重点实验室)
2.河南农业大学食品科学技术学院
关键词: 半抗原;通用型免疫层析试纸;双咪苯脲;抗体筛选;残留检测
期刊名称: 河南农业科学
ISSN: 1004-3268
年卷期: 2024 年 53 卷 009 期
页码: 117-125
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了提高单克隆抗体筛选效率,降低免疫层析检测方法建立门槛,利用生物素标记人工抗原为探针,以亲和素固定于硝酸纤维素膜上为检测线,建立了通用型半抗原免疫层析试纸,并将其应用于双咪苯脲(IM)单克隆抗体的筛选及残留检测。结果表明,利用碳二亚胺法成功制备了IM人工抗原及生物素探针;通过免疫小鼠及杂交瘤细胞技术制备单克隆抗体;应用试纸筛选,成功获得IM单克隆抗体细胞株1株,其效价为1∶32 000,灵敏度为6.25 ng/mL。基于该单抗及通用型半抗原免疫层析试纸建立了IM免疫层析检测试纸,检测牛奶中IM的灵敏度为7 ng/mL。该试纸及其探针制备方法可以通用于半抗原抗体筛选,为抗体筛选提供了一种更高效的方法;无需免疫层析试纸研发平台即可建立半抗原免疫层析检测方法,为免疫层析试纸的研发提供了新的技术手段。
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