文献类型： 中文期刊

作者： 赵帅 ¹ ; 王立民 ² ; 王聪慧 ¹ ; 唐红 ² ; 张宾 ² ; 郭延华 ² ; 张译元 ² ; 赵兴旺 ³ ; 丁新平 ⁴ ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆兵团绵羊繁育生物技术重点实验室

3.石河子石总场畜牧兽医服务中心

4.新疆西部牧业股份有限公司紫泥泉种羊场

关键词： 转基因绵羊;实时荧光定量PCR;拷贝数

期刊名称： 新疆农业科学

ISSN： 1001-4330

年卷期： 2015 年 52 卷 08 期

页码： 1517-1521

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】利用高通量、快速、灵敏的实时荧光定量PCR法,检测转类胰岛素样生长因子1-红色荧光蛋白基因(insulin-like growth factor 1-red fluorescent protein,IGF1-RFP)绵羊中外源基因的拷贝数。【方法】以甘油醛-3-磷酸脱氢酶(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase,GAPDH)作为绵羊的内源参照基因,梯度稀释法。【结果】分别获得RFP和GAPDH基因的Ct值与起始模板数的相关性标准曲线,R2分别为0.999和0.999,相关性高。通过比较目的基因RFP和GAPDH起始模板数,得到外源基因在转基因绵羊中的拷贝数。编号0152、0216、0217、0218的转基因绵羊拷贝数分别为3、1、1、1。【结论】以IGF-I转基因细毛羊为研究对象,针对外源基因序列和内源参照基因序列设计特异性引物,利用实时荧光定量PCR法对IGF-I转基因细毛羊外源基因的拷贝数进行检测,并且准确检测外源基因的拷贝数。