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剑尾鱼卵黄脂磷蛋白的纯化及免疫分析

文献类型: 中文期刊

作者: 温茹淑 1 ; 方展强 1 ; 江世贵 2 ; 马广智 1 ; 徐杰 1 ; 姚静 1 ;

作者机构: 1.华南师范大学生命科学学院

2.农业部渔业生态环境重点开放实验室广东省渔业生态环境重点实验室中国水产科学研究院南海水产研究所

关键词: 剑尾鱼;卵黄脂磷蛋白;纯化;免疫分析

期刊名称: 水产学报

ISSN: 1000-0615

年卷期: 2007 年 31 卷 05 期

页码: 89-96

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用Sephacryl S-300凝胶过滤层析柱和HiTrap Q阴离子交换柱从卵黄生成期的雌性剑尾鱼(Xiphophorus helleri)卵巢组织提纯了卵黄脂磷蛋白(Lv)。已确定被纯化的剑尾鱼Lv在Native-PAGE(4%~7.5%)电泳中分子量为530 kD左右。Native-PAGE(4%~7.5%)电泳后的凝胶分别进行糖蛋白染色、脂蛋白染色及磷蛋白染色。结果表明,剑尾鱼Lv是一种富含糖、脂、磷的蛋白。用纯化的剑尾鱼Lv免疫大白鼠获得鼠源多克隆抗血清。用免疫双扩散的方法测定Lv抗血清的效价为l∶32。Western-blotting检测显示抗血清的特异性较好;卵黄蛋白原(Vtg)和Lv抗血清之间存在明显的免疫交叉反应,表明Vtg和Lv两者具有相同的免疫原性。免疫双扩散检测表明,抗Lv血清表现出明显的雌性特异性和种的特异性。

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