文献类型: 中文期刊
作者: 徐畅 1 ; 何好 2 ; 李国良 2 ; 金淑梅 3 ;
作者机构: 1.东北林业大学东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室;黑龙江省农业科学院玉米研究所
2.;东北林业大学东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室;黑龙江省农业科学院玉米研究所
3.;东北林业大学东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室;黑龙江省农业科学院玉米研究所;
关键词: 紫花苜蓿;金属硫蛋白;表达特性;抗逆性
期刊名称: 草业学报
ISSN: 1004-5759
年卷期: 2018 年 04 期
页码: 89-97
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 根据NCBI中紫花苜蓿1型金属硫蛋白基因(MET1,登录号:AF189766.1)cDNA序列设计一对特异性引物,以紫花苜蓿品种"农菁1号"的cDNA为模板,利用PCR技术克隆出的一个基因,命名为MsMT1,测序发现该基因全长228bp,编码75个氨基酸。通过碱基序列比对发现MsMT1与MET1的相似度为99%。通过氨基酸序列分析和进化树分析,发现与其他植物的1型金属硫蛋白基因具有较高的同源性。利用qRT-PCR对MsMT1在苜蓿不同器官中的表达进行分析,发现该基因在根和子叶中表达量较高。将苜蓿幼苗进行不同浓度NaCl、Na_2CO_3、NaHCO_3及不同pH值胁迫处理后,观察MsMT1基因的表达,发现MsMT1的表达量随盐碱处理液浓度和pH值变化发生改变,说明MsMT1与植物的抗逆性相关。采用农杆菌介导法将MsMT1导入苜蓿植株体内,卡那抗性的筛选和Northern blot结果显示MsMT1基因能够在转基因苜蓿中高效表达。用不同浓度NaCl、NaHCO_3处理野生型和转化MsMT1基因的苜蓿幼苗,观察幼苗受胁迫后的表型,发现转基因的苜蓿幼苗比未转基因的苜蓿幼苗抵抗力高。本研究表明MsMT1基因能够增加苜蓿对胁迫的抗性。
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