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棉花GhCAD6基因表达载体构建及GUS基因的瞬时表达

文献类型: 中文期刊

作者: 倪志勇 1 ; 吕萌 1 ; 王娟 1 ; 李波 1 ; 白岩 1 ; 范玲 1 ;

作者机构: 1.新疆农科院核技术生物技术研究所

关键词: CAD;载体构建;瞬时表达;GUS基因

期刊名称: 新疆农业科学

ISSN: 1001-4330

年卷期: 2010 年 47 卷 01 期

页码: 20-24

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 【目的】以GUS基因为报告基因,构建GhCAD6基因的瞬时表达载体。【方法】采用PCR方法和基因枪法。【结果】用PCR法,以pGEM-T-CAD6质粒为模板,获得GhCAD6基因目的片段。然后将其克隆到瞬时表达载体pRTL2-GUS/NIa中,获得由CaMV35S启动子调控目的基因的pGUS-CAD6融合表达载体,使目的基因能够和GUS基因同时表达。采用基因枪法将pGUS-CAD6转化到洋葱表皮细胞中,暗培养24 h,经GUS组织化学染色,检测到多个洋葱细胞呈现蓝色。【结论】构建的瞬时表达载体可在植物细胞中高效表达,为进一步研究棉花GhCAD6基因的功能奠定了实验基础。

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