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青蟹双顺反子病毒-1原位杂交检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 崔亚婷 1 ; 倪军 2 ; 马红玲 1 ; 许海东 1 ; 冯娟 1 ; 申亚阳 1 ; 郭志勋 1 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所/农业部水产品加工重点实验室

2.广东省水生动物疫病预防控制中心

关键词: 拟穴青蟹;青蟹双顺反子病毒-1;地高辛核酸探针;原位杂交

期刊名称: 广东农业科学

ISSN: 1004-874X

年卷期: 2015 年 42 卷 11 期

页码: 130-134+193

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 根据青蟹双顺反子病毒-1(mud crab dicistrovirus-1,MCDV-1)基因的保守序列设计1对引物,从感染MCDV-1的青蟹鳃组织中提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到1 314 bp的c DNA片段。纯化后的PCR产物用地高辛(DIG)标记制备核酸探针,此探针与青蟹呼肠孤病毒(MCRV)、鲍肌肉萎缩症病毒(Ab SV)、类疱疹病毒(Ab HV)、白斑综合症病毒(WSSV)、虎纹蛙病毒(TFV)、锦鲤疱疹病毒(KHV)等水生动物常见病毒均无交叉反应,可以特异性的检测出MCDV-1,检出MCDV-1的灵敏度为8.58×107 copies/μL。采用原位杂交检测方法检测拟穴青蟹组织中MCDV-1的组织分布,结果表明,拟穴青蟹中MCDV-1 RNA的阳性信号主要分布于肝胰腺、神经节、肠道和食管。

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