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家兔γ干扰素基因的原核表达及其表达产物的单克隆抗体的制备

文献类型： 中文期刊

作者： 彭伟 1 ; 宋艳华 2 ; 胡波 3 ; 范志宇 4 ; 魏后军 5 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

2.南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室

3.中山大学附属第三医院

4.江苏省农业科学院兽医研究所

5.江苏省农业科学院兽医研究所/农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心

关键词： 家兔;γ干扰素;原核表达;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2014 年 09 期

页码： 939-943

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 将PCR扩增的家兔γ干扰素基因克隆至pET-28a(+)原核表达载体上,构建重组载体pET-28a(+)-IFN-γ。重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导、HisTrap亲和柱纯化,获得IFN-γ重组蛋白。以IFN-γ重组蛋白为抗原免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤细胞技术获得4株抗IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,分别被命名为3H8、4G4、4F10、6C12,它们的亚型分别为IgG1、κ链,IgG2b、κ链,IgG1、κ链,IgG1、κ链。分别制备单克隆抗体腹水,结果,4株单克隆抗体腹水的间接ELISA效价在10-4~10-5之间。本试验通过制备抗家兔IFN-γ单克隆抗体,为研究和检测IFN-γ提供了一种重要的工具。

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