文献类型： 中文期刊

作者： 司贺龙 ¹ ; 佟亚萌 ¹ ; 郝志敏 ¹ ; 李志勇 ² ; 王楠 ³ ; 董志平 ² ; 董金皋 ¹ ;

作者机构： 1.河北农业大学生命科学学院

2.河北省农林科学院谷子研究所

3.河北师范大学生命科学学院

关键词： 粟弯孢病菌;G蛋白β亚基;qRT-PCR;原核表达

期刊名称： 华北农学报

ISSN： 1000-7091

年卷期： 2014 年 29 卷 04 期

页码： 7-12

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在获得粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因,明确其表达模式,为阐明该基因对粟弯孢霉叶斑病菌致病性的调控机制奠定基础。运用SMART RACE RT-PCR技术,克隆粟弯孢霉叶斑病菌G蛋白β亚基基因ClGβ全长cDNA序列,以qRT-PCR技术,对该基因在粟弯孢霉叶斑病菌不同生长时间的表达特征进行分析。结果表明,ClGβ基因cDNA编码区为1 056 bp,DNA包含4个内含子和5个外显子,编码351个氨基酸。该基因的cDNA序列在GenBank中注册的登录号为JQ768316。qRT-PCR结果表明,Gβ基因在菌株生长过程中表现出前期表达量较低而后期表达量明显升高的趋势。构建了pET28(a)-ClGβ原核表达载体,经IPTG诱导,目的蛋白在宿主菌E.coli BL21中获得表达,表达产物分子量与ClGβ蛋白计算分子量一致。