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中国小麦花叶病毒(CWMV)复制酶基因在病株体内的表达分析

文献类型： 中文期刊

作者： 张芬 1 ; 蔡年俊 1 ; 羊健 2 ; 李静 2 ; 陈剑平 2 ; 张恒木 2 ;

作者机构： 1.浙江师范大学化学与生命科学学院

2.浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所

关键词： 中国小麦花叶病毒;多克隆抗体;复制酶

期刊名称： 植物病理学报

ISSN： 0412-0914

年卷期： 2017 年 47 卷 05 期

页码： 640-646

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 中国小麦花叶病毒(Chinese wheat mosaic virus,CWMV)是引起我国小麦花叶病的重要病原之一,其基因组由2条单链正义RNA片段(RNA1-2)组成。本研究根据发表的基因组序列设计特异性引物,扩增了CWMV复制酶基因的部分片段(nt102~1101),并克隆至原核表达载体pGEX-6P1,然后导入大肠杆菌E.coli BL21(DE3)pLysS中诱导表达。重组的复制酶蛋白经亲和层析纯化后免疫家兔制备多克隆抗体。Western-blot分析表明该抗体具有高度的特异性,能用于病株体内CWMV复制酶蛋白的检测。检测分析显示在病株体内,CWMV基因组RNA1可直接充当其复制酶基因的mRNA;在感染的细胞中,其复制酶组分主要是RNA1 ORF1编码的蛋白,分子量约153 kDa,且特异性地定位于膜结构上。

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