文献类型： 中文期刊

作者： 聂细荣 ¹ ; 薛明洋 ² ; 林格 ² ; 李逸群 ² ; 范玉顶 ² ; 刘文枝 ² ; 孟彦 ² ; 江南 ² ; 曾令兵 ² ; 周勇 ² ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.中国水产科学研究院长江水产研究所

关键词： 鲤疱疹病毒Ⅱ型;ORF25B基因;酵母双杂交;诱饵载体;互作蛋白

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2021 年 010 期

页码： 3103-3113

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】鲤疱疹病毒Ⅱ型（Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2）感染养殖鲫引起的鲫造血器官坏死病,给鲫养殖业造成了重大的经济损失。揭示CyHV-2感染宿主细胞的机制,是建立鲫造血器官坏死病有效防治技术的重要基础。【方法】本研究针对CyHV-2富含抗原表位的ORF25B区域设计引物,扩增ORF25B基因截短序列。将扩增产物克隆至酵母双杂交诱饵载体pGBKT7,构建诱饵载体pGBKT7-tORF25B,转化至酵母菌株Y2HGold中。在营养缺陷型培养基上,验证诱饵表达载体pGBKT7-tORF25B对酵母菌Y2HGold自激活现象和毒性作用。利用酵母双杂交技术,将诱饵菌株pGBKT7-tORF25B/Y2HGold与鲫脑组织细胞系（GiCB）cDNA文库杂交。【结果】ORF25B基因截短序列扩增大小约为981 bp,成功构建了诱饵菌株pGBKT7-tORF25B/Y2H Gold,自激活和毒性验证结果表明,诱饵表达载体对酵母菌株无自激活现象,也无毒性作用,初步筛选出4种与tORF25B基因编码蛋白互作的宿主蛋白。【结论】本研究结果为深入开展CyHV-2 ORF25B编码蛋白功能及病毒入侵宿主细胞的机制研究奠定了重要基础。