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基于TaqMan探针的猪圆环病毒1型实时荧光定量PCR检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 张福良 1 ; 宋长绪 2 ; 朱道中 3 ; 徐维加 4 ;

作者机构: 1.安阳工学院

2.广东省农业科学院兽医研究所

3.广州出入境检验检疫局

4.云南出入境检验检疫局

关键词: 猪圆环病毒1型;实时荧光定量PCR;TaqMan探针

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2007 年 37 卷 06 期

页码: 477-481

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用PCR方法克隆了猪圆环病毒1型(PCV1)ORF2基因,构建了重组质粒pMD-ORF2并将其作为标准阳性模板。通过对反应条件进行优化,以定量的10倍系列稀释的质粒pMD-ORF2为标准品进行荧光定量PCR扩增,建立了检测PCV1的荧光定量PCR方法。结果显示,该方法的检测灵敏度可达1.0×101拷贝/μL;对起始浓度为1.0×107、1.0×106、1.0×105拷贝/μL标准品的最终实际测得值分别为1.001×107、0.869×106和0.988×105拷贝/μL,变异系数分别为4.758%、1.865%和3.836%。表明,此方法具有良好的准确性和重现性。

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