文献类型： 中文期刊

作者： 时小光 ¹ ; 李秀丽 ² ; 张闯年 ³ ; 黄平升 ³ ; 张建华 ¹ ; 王伟伟 ³ ; 鄢明华 ² ;

作者机构： 1.天津大学化工学院

2.天津市农业科学院畜牧兽医研究所

3.中国医学科学院生物医学工程研究所

关键词： 病毒灭活疫苗;免疫佐剂;纳米疫苗;细胞免疫;体液免疫;CpG;纳米乳

期刊名称： 生物医学工程与临床

ISSN： 1009-7090

年卷期： 2020 年 005 期

页码： 604-610

摘要： 目的探讨两种不同佐剂CpG和纳米乳(Nanoemulsion)对病毒灭活疫苗免疫效果的影响.方法以灭活猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)培养液为例,将骨髓来源树突状细胞(BMDC)与含有不同免疫佐剂的PDCoV灭活疫苗共孵育.抗体染色后使用流式细胞仪检测BMDC成熟、活化情况.成年健康C57BL/6J雌性小鼠20只,鼠龄6~8周;随机分成4组,分别接种磷酸盐缓冲溶液(PBS)、灭活PDCoV液、CpG/PDCoV疫苗和Nanoemulsion/PDCoV疫苗,皮下免疫3次,时间间隔为1周;第21天杀死小鼠获取脾脏和血液,检测不同PDCoV灭活疫苗接种小鼠免疫反应情况.结果 Nanoemulsion可负载灭活PDCoV的抗原成分,形成平均粒径为(157.6±0.4) nm的纳米粒,而CpG与灭活PDCoV则是无规则混合.Cp G/PDCoV组或Nanoemulsion/PDCoV组促BMDC成熟程度分别为45.57%和53.32%(CD86+MHCⅡ+BMDC),明显高于PDCoV组(38.49%),差异有统计学意义(P <0.01、P <0.05).第21天,CpG/PDCoV组小鼠脾脏中Th1(P <0.05)和Tc2(P <0.05)细胞比例分别为5.81%和0.24%,显著高于PDCoV组(3.56%和0.14%);Nanoemulsion/PDCoV组小鼠脾脏中Tc1(P <0.05)细胞比例为6.46%,高于PDCoV组(9.28%);CpG/PDCoV组小鼠血清中总免疫球蛋白(IgG)、IgG2a和干扰素-γ(IFN-γ)水平明显高于PDCoV组,差异有统计学意义(P <0.05);Nanoemulsion/PDCoV组小鼠血清中总IgG、IgG2a、IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素(IL-4)水平明显高于PDCoV组,差异有统计学意义(P <0.05);另外,与CpG相比,Nanoemulsion能够诱导更高水平的IgG2a、IFN-γ、TNF-α和IL-4.结论佐剂CpG或者Nanoemulsion的添加能够显著地增强病毒灭活疫苗免疫效果.相较于CpG,Nanoemulsion可以诱导更强的细胞免疫和体液免疫,更适用于病毒灭活疫苗的研发.