文献类型： 中文期刊

作者： 姚旭东 ¹ ; 蒙亚琦 ¹ ; 任秀美奥 ¹ ; 郭延华 ² ; 唐红 ² ; 张译元 ² ; 王立民 ² ; 周平 ¹ ;

作者机构： 1.石河子大学动物科技学院

2.新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室

关键词： 哈萨克羊;单碱基编辑;MSTN

期刊名称： 畜牧兽医学报

ISSN：

年卷期： 2021 年 008 期

页码： 2162-2170

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 肌肉生长抑制素（myostatin, MSTN）可负调控骨骼肌的发育。本研究利用胞嘧啶碱基编辑器（cytidine base editor, CBE）在哈萨克羊MSTN基因编码区提前引入终止密码子,以期达到敲除MSTN基因的目的。共设计2条靶向哈萨克羊MSTN基因不同外显子的sgRNAs,分别连接至pGL3-U6-sgRNA-PGK-puromycin质粒,并与pCMV-AncBE4 max-P2A-GFP质粒共转染哈萨克羊胎儿成纤维细胞,经Cruiser^TM酶酶切检测、Sanger测序和TA克隆分析。结果显示,成功筛选出可以在哈萨克羊MSTN基因外显子提前引入终止密码子的2条sgRNAs,其中STOPsg-1靶位点编辑效率为26.7%,STOPsg-2靶位点的编辑效率为6.7%。本研究成功运用CBE（AncBE4 max）技术在哈萨克羊胎儿成纤维细胞MSTN基因编码区实现定点编辑,为培育精确编辑MSTN基因的哈萨克羊奠定基础。