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抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白中和活性单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 洪家兵 1 ; 刘文晓 1 ; 王萍 1 ; 李永清 1 ;

作者机构： 1.江西农业大学动物科学技术学院;北京市农林科学院畜牧兽医研究所畜禽疫病防控技术北京市重点实验室

关键词： 牛传染性鼻气管炎病毒;gD蛋白;单克隆抗体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2019 年 49 卷 12 期

页码： 1514-1519

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了制备牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)gD蛋白的单克隆抗体,本研究用纯化的IBRV免疫BALB/c小鼠,然后以纯化的昆虫细胞表达的gD蛋白作为ELISA包被抗原筛选杂交瘤细胞株。结果获得3株能够稳定分泌抗gD蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株1B4、3E8和4F12。采用夹心ELISA鉴定单克隆抗体的Ig亚类,结果显示,1B4、3E8为IgG2b,4F12为IgG1。免疫印迹试验与间接免疫荧光试验表明,3株单克隆抗体均能与IBRV发生特异性反应。微量中和试验结果显示,1B4和3E8单克隆抗体具有中和IBRV的活性,中和效价均为1∶320。本研究成功制备了具备中和作用的抗牛传染性鼻气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体,为建立特异性的IBRV诊断方法及致病机理的研究提供了工具。

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