文献类型: 中文期刊
作者: 董婧 1 ; 逯晓萍 1 ; 吕二锁 2 ; 薛春雷 1 ; 李俊伟 1 ;
作者机构: 1.内蒙古农业大学
2.内蒙古农牧业科学院
关键词: 玉米;叶片;蛋白质提取;双向电泳
期刊名称: 华北农学报
ISSN: 1000-7091
年卷期: 2016 年 31 卷 04 期
页码: 13-18
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为了优化玉米叶片双向凝胶电泳技术条件,通过比较3种总蛋白提取方法对玉米双向电泳结果的影响,并对蛋白质上样量、IEF等电聚焦条件及SDS-聚丙烯酰胺凝胶浓度等参数进行探索、优化;结果发现,与酚提取法和磷酸缓冲液法相比,采用改进的TCA/丙酮法提取总蛋白操作简单、方便,所得的2-DE图谱中蛋白质点数量多、背景清晰,是一种适用于提取玉米苗期叶片总蛋白的有效方法;同时筛选出:第一向IEF等电聚焦样品上样量为800μg,聚焦条件为20 000 V/h,在浓度为12.5%的SDS-聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳,能够在17 cm的IPG胶条上获得背景低、分辨率较高、重复性好的双向电泳图谱,该优化体系适用于玉米叶片蛋白质组双向电泳分离,对玉米蛋白质组学研究具有重要参考价值。
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