文献类型： 中文期刊
作者： 马冬梅 1 ; 白俊杰 1 ; 邓国成 1 ; 李胜杰 1 ; 张莉莉 1 ;
作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所中国水产科学研究院热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室
关键词： 大口黑鲈溃疡综合征病毒;TaqMan-MGB探针;定量PCR;病毒检测
期刊名称： 华南农业大学学报
ISSN： 1001-411X
年卷期： 2011 年 32 卷 02 期
页码： 105-108
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 根据大口黑鲈溃疡综合征病毒(Largemouth bass ulcerative syndrome virus,LBUSV)的甲基转移酶(MTase)基因核苷酸序列设计引物及TaqMan-MGB探针,优化荧光定量PCR反应条件和反应体系,建立了LBUSV的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法.用含有MTase基因的质粒pDNA-MT系列稀释作为标准品模板,在荧光定量PCR仪上进行PCR反应,绘制标准曲线,斜率为-3.24,R2=0.999,呈现很好的线性关系,扩增效率1.04.灵敏度检测结果表明,PCR反应24个循环时可以检测到的质粒最小浓度是102拷贝数/μL.选用107、106、105、104拷贝数/μL 4个浓度梯度质粒做模板,变异系数在1.1%~3.4%范围内,说明该方法具有良好的重复性和稳定性.利用该方法可以准确地检测出感染LBUSV的病鱼,特异性强.
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