文献类型： 中文期刊
作者： 潘群兴 1 ; 诸玉梅 1 ; 王永山 1 ; 何孔旺 1 ; 王晓丽 1 ; 欧阳伟 1 ; 毕振威 1 ; 夏兴霞 1 ;
作者机构： 1.江苏省农业科学院院兽医研究所
关键词： 猪细小病毒;O型口蹄疫病毒;病毒样颗粒;分子设计
期刊名称： 江苏农业学报
ISSN： 1000-4440
年卷期： 2013 年 29 卷 001 期
页码： 101-107
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 综合运用生物信息学和分子生物学技术,模拟PPVVP2蛋白表面不同Loop区插入O型FMDVVPl蛋白上多表位基因(VPl:21-40、141~160和200~213残基)空间构象,并在VP2N端引入通用型辅助性T淋巴细胞表位(PADRE),人工合成嵌合基因并克隆到杆状病毒转移载体pFastBacHTA中,转化E.coliDH10Bac感受态细胞,经三抗筛选,获得重组杆状病毒表达质粒rBac-FMDVVPl:PPVVP2,用脂质体法转染Sf9细胞.对rBac.FMDVVP1:PPVVP2感染的Sf9细胞,用间接免疫荧光试验(IFA)检测,具有特异性荧光;用Western-blotting分析,在64000处出现一条特异蛋白条带;电镜观察,重组VP2蛋白能够自主组装成病毒样颗粒.红细胞凝集试验证实,表达的嵌合蛋白PPV:VP2-FMDV:VPl具有与全病毒类似的血凝活性.
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