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犬细小病毒JS12株VP2基因的分子特征及其在大肠杆菌中的表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王永山 1 ; 毕振威 2 ; 夏兴霞 3 ; 欧阳伟 4 ;

作者机构： 1.南京军区军事医学研究所

2.江苏省农业科学院兽医研究所农业部兽用生物制品工程技术重点实验室国家兽用生物制品工程技术研究中心

3.江苏省农业科学院兽医研究所

4.南京农业大学动物医学院

关键词： 犬细小病毒;VP2基因;分子特征;病毒变异;原核表达;间接ELISA

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2013 年 10 期

页码： 991-998

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 从犬细小病毒病免疫预防失败病犬体内分离到1株犬细小病毒(CPV),命名为CPV-JS12株。病毒可凝集猪的红细胞,对乙醚不敏感,pH3不能灭活病毒,pH10可使病毒失去感染性,56℃作用60min病毒仍有活性,80℃作用30min可灭活病毒。序列分析时CPV-JS12为CPV-2a亚型,VP2基因全长1755nt,编码584aa,与国外CPV毒株VP2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别在98.9%~99.6%和98.3%~99.7%之间,与国内和周边地区毒株VP2基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性分别在99.0%~99.7%和97.9%~99.7%之间;16个中国分离株处在不同组,CPV-JS12株与韩国毒株DH426处在同一分支上,亲缘关系较近。对CPV-JS12与免疫毒株VP2蛋白的立体结构分析比较,发现有9处氨基酸残基变异,其中6处位于衣壳蛋白表面,5处位于抗原表位区。将VP2基因在大肠杆菌中表达,重组VP2蛋白的分子质量为67.0ku,主要以包涵体的形式存在;Western-blot分析中重组VP2蛋白可与CPV阳性血清发生特异性反应。以纯化的重组VP2蛋白为抗原建立的CPV抗体间接ELISA检测方法具有良好的特异性。

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