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中蜂囊状幼虫病毒RT-PCR检测方法的建立与应用

文献类型: 中文期刊

作者: 张明华 1 ; 韦小平 2 ; 周碧君 1 ; 文明 1 ; 程振涛 1 ; 田琴 1 ; 王开功 1 ;

作者机构: 1.贵州大学动物科学学院

2.贵州省现代农业发展研究所

关键词: 中蜂囊状幼虫病毒;RT-PCR;VP3基因;中华蜜蜂

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2021 年 003 期

页码: 275-280

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立中蜂囊状幼虫病毒(CSBV)核酸的特异性检测方法,以CSBV结构蛋白VP3基因为靶基因,根据GenBank中序列合成1对特异性引物,建立了CSBV RT-PCR检测方法。以CSBV克隆质粒作为模板和蜜蜂6种不同病毒,分别进行特异性、敏感性、重复性试验。结果显示:所建立的RT-PCR检测方法能扩增出CSBV特异性片段,且不能扩增出蜜蜂以色列急性麻痹病毒、蜜蜂畸翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、黑蜂王台病毒、蜜蜂克什米尔病毒;CSBV阳性质粒最低检测质量浓度为2.82 fg/m L;对CSBV阳性质粒和双蒸水空白对照组重复检测3次,均能扩增出与预期一致的特异性片段。利用该检测方法对从贵州省不同养蜂场采集的100份中华蜜蜂样本进行检测,71份样本为阳性,通过序列比对分析,同源性高达99.16%,进一步证实为CSBV。结果表明,所建立的CSBV检测方法特异性强、敏感性高、重复性好,具有良好的实用性。

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