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猪传染性胃肠炎病毒聚合酶基因反义RNA对病毒的抑制作用

文献类型： 中文期刊

作者： 于晓龙 1 ; 张海峰 2 ; 李一经 3 ;

作者机构： 1.黑龙江省农业科学院博士后工作站

2.黑龙江省农业科学院畜牧研究中心

3.东北农业大学动物医学院

关键词： 猪传染性胃肠炎病毒;反义RNA;逆转录病毒表达载体

期刊名称： 中国兽医科学

ISSN： 1673-4696

年卷期： 2006 年 36 卷 02 期

页码： 85-88

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 通过PCR扩增出猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)聚合酶部分片段,反向插入逆转录病毒表达载体pLXSN中,用脂质体法将重组质粒plxas-pol转染PA317细胞,经抗生素G418筛选出稳定的产毒细胞克隆,分别扩大培养后,取其上清液感染小鼠成纤维细胞NIH3T3,细胞克隆产生的重组病毒效价达9.0×105CFU/mL。用高效价假病毒感染IBRS2细胞,再经抗生素G418筛选,提取细胞克隆总RNA,经RT-PCR证明plxas-pol整合入IBRS2细胞。以TGEV感染IBRS2细胞和具有抗性的IBRS2细胞所产生的细胞病变为指标,证明该反义RNA对病毒有明显抑制作用,抑制率约为80%。用2×103和4×102TCID50/mL剂量的TGEV感染时,引起细胞死亡的时间分别为21 h和27 h,与对照组相比,抗性细胞系可明显延迟因病毒感染引起细胞死亡的时间。

  • 相关文献

[1]猪传染性胃肠炎病毒sM基因反义逆转录病毒的包装和鉴定. 于晓龙. 2005

[2]反义RNA介导的抗猪传染性胃肠炎病毒感染. 于晓龙. 2005

[3]白桦反义CCoAOMT基因调控木质素生物合成. 姚连梅,胡晓晴,周菲,郑要强,王国东,刘雪梅. 2019

[4]猪传染性胃肠炎病毒和猪轮状病毒混合感染的PCR检测. 于晓龙. 2006

[5]PEDV、TGEV、PoRV和PKV多重RT-PCR检测方法的建立及初步应用. 苗艳,陈亮,朱庆贺,李阳,兰世捷,徐馨,李丹. 2020

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