文献类型： 中文期刊

作者： 王静 ¹ ; 刘成倩 ² ; 李红 ² ; 易建中 ² ; 于宗幸 ¹ ; 陈磊 ¹ ; 孙晓云 ¹ ;

作者机构： 1.上海海洋大学水产与生命学院

2.上海市农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： 猪圆环病毒2型;Rep基因;真核表达载体;间接免疫荧光

期刊名称： 上海农业学报

ISSN： 1000-3924

年卷期： 2016 年 32 卷 01 期

页码： 6-9

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GenBank发表的猪圆环病毒2型(PCV2)基因序列设计并合成1对特异性引物,进行PCR扩增,从PCV2突变株中扩增出PCV2 Rep基因,对PCR扩增产物清洁后进行双酶切,连接到pEGFP-C1载体上,转化到大肠杆菌DHSα感受态细胞中,经PCR筛选和测序后鉴定出正确的重组基因,完成真核表达载体的构建。将重组质粒转染到PK15细胞中,收取病毒液抽提DNA,PCR检测到Rep基因,证明转染是成功的。进行间接免疫荧光试验,可以检测Rep基因在PK15细胞中的表达,试验结果很好的验证了Rep基因的免疫原性。这为进一步研究PCV2的生物学活性及PCV2新型疫苗奠定了坚实的基础。