文献类型: 中文期刊
作者: 李兰 1 ; 张浩明 1 ; 杨利 1 ; 程海卫 1 ; 侯立婷 1 ; 张元鹏 1 ; 侯继波 1 ; 陈瑾 1 ; 郑其升 1 ;
作者机构: 1.江苏省农业科学院动物免疫工程研究所
关键词: 刀豆蛋白A;猪流行性腹泻病毒;纯化
期刊名称: 中国农业大学学报
ISSN:
年卷期: 2023 年 011 期
页码: 125-130
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 为开发一种新型高效、低成本的猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)抗原纯化方法,本研究尝试了一种基于凝集素(刀豆蛋白A,Con A)的PEDV浓缩纯化方法。通过Con A与PEDV病毒粒子的特异性结合,形成Con A-PEDV复合物,然后通过低速离心和竞争性解离即可实现病毒纯化。结果表明:1)当Con A的使用浓度为80μg/mL,室温作用2 h, 4 000 r/min离心15 min时,纯化效果较佳;2)利用Tris-HCl缓冲液(pH 7,0.01 mol/L,内含200 mmol/L甲基-α-D-吡喃甘露糖苷和50 mmol/L NaCl)进行解离时,较PBS缓冲液有更高的解离效率;3)该方法病毒回收率大约为80%,总蛋白去除率可达90%。综上,本研究利用Con A纯化PEDV是可行的,为高质量PEDV灭活疫苗的研发奠定基础。
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