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植酸酶单克隆抗体的制备及鉴定

文献类型: 中文期刊

作者: 胡骁飞 1 ; 魏凤仙 2 ; 李青梅 1 ; 职爱民 1 ; 王方雨 1 ; 孙亚宁 1 ; 柴书军 1 ; 付晓鹤 3 ;

作者机构: 1.河南省农业科学院

2.河南省农业科学院畜牧兽医研究所

3.郑州市兽药饲料监察所

关键词: 植酸酶;杂交瘤;单克隆抗体;ELISA

期刊名称: 华北农学报

ISSN: 1000-7091

年卷期: 2012 年 27 卷 05 期

页码: 44-48

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 通过细胞融合建立分泌抗植酸酶单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法制备单克隆抗体,并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明,筛选出2株杂交瘤细胞,其中,5C3细胞株产生单抗亚型为IgG1型,效价为1∶(1.02×106),IC50=100.07 ng/mL,亲和常数为6.70×109L/mol,与市售常规植酸酶、包被植酸酶及浓缩植酸酶的IC50分别达到130.43,126.16,125.33 ng/mL,交叉反应率分别为76.72%,79.32%和79.84%。与高温失活(100℃水煮5 min)的麸皮植酸酶、普通植酸酶、包被植酸酶及浓缩植酸酶IC50分别为4 205.45,4 015.86,3 593.19,3 610.40ng/mL,交叉反应率分别为2.38%,2.49%,2.78%,2.77%。说明成功筛选了杂交瘤细胞株,该细胞株能分泌抗植酸酶mAb,该植酸酶mAb对植酸酶亲和力高、特异性强、灵敏度好,为植酸酶ELISA检测试剂盒及试纸条研制奠定了基础。

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