文献类型： 中文期刊
作者： 李永清 1 ; 杨敬 2 ; 罗长保 3 ; 周雪媚 1 ; 张莉 1 ; 章振华 1 ;
作者机构： 1.北京市农林科学院畜牧兽医研究所
2.军事医学科学院动物中心
3.广州出入境检验检疫局
关键词： 禽流感病毒;M2基因;马立克氏病病毒;基因重组
期刊名称： 中国生物工程杂志
ISSN： 1671-8135
年卷期： 2007 年 27 卷 09 期
页码： 24-30
收录情况： 北大核心 ; CSCD
摘要： 将禽流感病毒M2基因克隆于真核表达质粒pIRES-EGFP中,使其位于pCMV启动子的调控下,并与绿色荧光蛋白基因(EGFP)串联后,将上述串联基因插入到含MDV CVI988的非必需区US基因的重组质粒pUS2中,构建带标记的重组质粒,然后将此重组质粒转染感染了MDVCVI988的鸡胚成纤维细胞,利用同源重组的方法,筛选了表达禽流感病毒M2基因的重组病毒MDV1。经PCR、dot blotting,Western blotting等实验的结果表明,禽流感病毒M2基因的确插入到MDV1(CVI988)基因组中并获得表达。重组MDV1免疫1日龄SPF鸡21天后,用ELISA可检测到M2蛋白的特异性抗体。接种了重组病毒rMDV的鸡体内针对H9N2疫苗血凝素的抗体滴度(p<0.05)明显提高,以禽流感病毒AIVA/Chicken/Guangdong/00(H9N2)攻毒后进行病毒重分离试验的结果发现,重组病毒能有效地降低病毒的排出量(p<0.01),说明该重组病毒可以用于防制禽流感的免疫。
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