文献类型： 中文期刊

作者： 乔绪稳 ¹ ; 李鹏成 ¹ ; 郑其升 ¹ ; 陈瑾 ¹ ; 于晓明 ¹ ; 侯立婷 ¹ ; 吴楠 ¹ ; 侯继波 ¹ ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院国家兽用生物制品工程研究中心

关键词： 乳酸乳球菌;肽聚糖锚钩蛋白;原核表达;GEM;结合活性

期刊名称： 微生物学报

ISSN： 0001-6209

年卷期： 2015 年 55 卷 02 期

页码： 193-197

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】比较两种含不同个数基序乳酸乳球菌肽聚糖锚钩蛋白(protein anchor,PA)的结合活性。【方法】首先应用PCR技术分别扩增得到含有2个或3个自溶素基序(Lysin Motif,Lys M)基因片段的PA2与PA3;然后应用p ET-32a(+)质粒构建原核表达载体,将其转化大肠杆菌BL-21(DE3),进行诱导表达,获得目的蛋白;最后将经复性后的PA2、PA3融合蛋白与GEM(Gram-positive Enhancer Matrix,GEM)颗粒结合,经Western blot、透射电镜与SDS-PAGE进行结合鉴定与结合活性比较分析。【结果】融合蛋白PA2、PA3复性后都能与GEM结合,PA3与GEM颗粒的结合活性明显好于PA2。【结论】含有3个Lys Ms的PA对GEM的结合活性明显优于含有2个Lys Ms的PA。本研究可为进一步完善乳球菌外壳-蛋白锚钩展示系统提供理论基础。