文献类型: 中文期刊
作者: 李慧萍 1 ; 傅洪拓 2 ; 李法君 2 ; 乔慧 2 ; 姚建华 2 ;
作者机构: 1.南京农业大学无锡渔业学院
2.南京农业大学无锡渔业学院;中国水产科学研究院淡水渔业研究中心农业部水生动物遗传育种和养殖生物学重点开放实验室
关键词: 鲤鱼;AFLP;银染体系
期刊名称: 中国农学通报
ISSN: 1000-6850
年卷期: 2009 年 25 卷 03 期
页码: 288-292
收录情况: 北大核心
摘要: 以鲤科鱼类建鲤为材料,对扩增片断长度多态性(AFLP)反应体系进行优化,建立适合于鲤鱼的AFLP反应体系。通过对AFLP常规流程中基因组DNA提取、酶切-连接、预扩、选扩及电泳-银染过程的优化,初步建立了适合鲤鱼的AFLP分析体系:采用鲤血细胞DNA提取;MseI和EcoRI37℃双酶切5h;预扩引物为E+A和M+C;选扩引物E+3与M+3浓度配比为1:8,为提高引物与模板的结合效率,选扩程序均采用touch-down程序;最后结合经典AgNO3-Na2CO3银染显色。通过优化的AFLP程序,从64对引物中筛选出8对多态性引物,为进一步的鲤鱼种质资源研究奠定基础。
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