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粮油作物中伏马菌素B_1免疫测定方法的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 胡骁飞 1 ; 王方雨 2 ; 邢广旭 3 ; 杨继飞 2 ; 张改平 4 ;

作者机构： 1.河南农业大学牧医工程学院

2.河南省农业科学院河南省动物免疫学重点实验室

3.河南省农业科学院生物技术研究所

4.河南省动物免疫学重点实验室

关键词： 粮油作物;伏马菌素B_1;细胞融合;单克隆抗体;免疫检测

期刊名称： 中国粮油学报

ISSN： 1003-0174

年卷期： 2015 年 30 卷 07 期

页码： 116-122

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 旨在制备伏马菌素B_1单克隆抗体,并建立伏马菌素B_1免疫学检测方法。以制备的免疫原FB_1-BSA免疫小鼠,利用细胞融合技术建立能分泌抗FB1抗体的杂交瘤细胞株,体内诱生腹水的方法制备FB_1单抗。基于制备的FB_1单抗,建立间接竞争ELISA检测分析方法,并对检测方法性能进行了初步鉴定。结果表明,通过动物免疫、细胞融合筛选到1株分泌抗FB_1抗体的杂交瘤细胞株3F6。建立的间接竞争ELISA检测分析方法检测范围40~600 ng/mL之间,检测下限达到40 ng/mL,半数抑制浓度IC_(50)为136.81 ng/mL,除与FB1特异性反应外,与同系物FB2及FB3交叉反应率分别为11.65%和7.85%,与黄曲霉毒素B_1、黄曲霉毒素M_1、β-玉米赤霉烯醇、呕吐毒素、T-2毒素、玉米赤酶烯酮、赭曲霉毒素A、玉米赤霉酮、α-玉米赤霉醇交叉反应率均低于0.2%,样品回收率在88.89%到115.45%之间,平均101.91%,变异系数为7.43%。本研究建立的ELISA方法与LC-MS-MS检测相同的样品时,二者的检测结果没有显著差异(P>0.05)。本研究初步研发出灵敏度符合检测要求、特异较强、准确度较高、简便快捷的FB1免疫学检测方法 。

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