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春兰基因组DNA提取及RAPD反应体系的优化

文献类型： 中文期刊

作者： 单丽丽 1 ; 陆瑞菊 1 ; 王亦菲 1 ; 孙月芳 1 ; 陆惠丽 1 ; 黄剑华 1 ;

作者机构： 1.上海市农业科学院生物技术研究所

期刊名称： 湖南农业大学学报(自然科学版)

ISSN： 1007-1032

年卷期： 2007 年 S1 期

页码： 248

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 以春兰为研究材料,对春兰基因组DNA的提取以及RAPD-PCR反应体系进行了优化.结果表明,在提取液中加入PVP和β-巯基乙醇去除酚类物质,采用高盐沉淀DNA和多次洗涤去除糖类,可以得到高质量春兰基因组DNA.电泳检测表明,所获得的DNA完整,无降解,完全可以满足RAPD等分子标记分析的需要.同时对春兰RAPD-PCR反应体系中各个影响因素进行了优化,建立了适合春兰RAPD分子标记的最佳反应体系,即20μL反应体系中含1UTaqDNA聚合酶,60μmol/LdNTPs,2.25mmol/LMg2+,1.0μmol/L引物,1.5ng/μL模板DNA.

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