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基于GFP观察的花粉介导植物转基因方法的细胞学研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李娜 1 ; 孙毅 2 ; 杨利艳 3 ;

作者机构： 1.山西师范大学生命科学学院

2.山西省农业科学院生物技术研究中心

3.农业部黄土高原作物基因资源与种质创制重点实验室

关键词： 细胞学观察;绿色荧光蛋白;花粉介导转化;超声波

期刊名称： 植物学报

ISSN： 1674-3466

年卷期： 2013 年 48 卷 06 期

页码： 616-622

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 花粉介导的植物转基因方法不需要组织培养过程,且操作简便易行。为明确该方法的细胞学基础,以离体玉米(Zea mays)郑单958花粉为材料,在超声波作用下将含有绿色荧光蛋白(GFP)基因的质粒与花粉共处理,对处理过的花粉进行体外培养及人工授粉,并利用荧光显微镜对GFP基因在玉米花粉粒、花粉管及胚中的表达进行示踪观察。结果表明:处理组和对照组均有部分花粉粒呈强烈的绿色荧光,因此通过观察花粉粒荧光来确定GFP基因是否表达不可靠;处理组花粉管较对照呈现强烈的绿色荧光;GFP基因在玉米胚中表达可以作为鉴定转化体的证据。该实验首次利用荧光观察为花粉介导植物转基因方法提供了可视的细胞学证据。

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