文献类型： 中文期刊
作者： 彭媛媛 1 ; 付小哲 2 ; 石存斌 2 ; 余露军 1 ; 李宁求 2 ; 吴淑勤 2 ;
作者机构： 1.上海海洋大学
2.中国水产科学研究院珠江水产研究所
关键词： 传染性脾肾坏死病毒(ISKNV);表达;纯化;抗体
期刊名称： 安徽农业科学
ISSN： 0517-6611
年卷期： 2009 年 37 卷 11 期
页码： 90-92
收录情况： 北大核心
摘要： [目的]构建传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)ORF086基因的融合表达载体,制备抗体为进一步研究ORF086蛋白的免疫保护性提供前提条件。[方法]PCR扩增目的基因,构建重组质粒,经酶切鉴定,PCR和核酸序列分析后,IPTG诱导表达,Ni-柱纯化,注射新西兰白兔获得抗血清。[结果]扩增出ORF086基因,成功构建了重组质粒pET32a-ORF086,SDS-PAGE电泳和Western-blot分析显示,获得一条36.0 kD的融合蛋白。[结论]成功构建了原核表达载体,融合蛋白主要以包涵体的形式存在,经柱层析纯化蛋白,纯度达90%以上。
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