文献类型： 中文期刊

作者： 张秋爽 ¹ ; 叶彩媚 ¹ ; 牛银杰 ¹ ; 林强 ¹ ; 梁红茹 ¹ ; 罗霞 ¹ ; 李宁求 ¹ ; 付小哲 ¹ ;

作者机构： 1.中国水产科学研究院珠江水产研究所

关键词： 鳜;鳜弹状病毒（SCRV）;鳜c-Myc;蛋白互作;谷氨酰胺代谢

期刊名称： 水产学报

ISSN： 1000-0615

年卷期： 2024 年 005 期

页码： 56-64

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究鳜弹状病毒（SCRV）如何调控鳜c-Myc （Sc-c-Myc）进而调控谷氨酰胺代谢的分子机制，本研究通过免疫共沉淀联合蛋白质谱寻找可能与Sc-c-Myc互作的病毒蛋白，初步分析确定为核衣壳蛋白（N蛋白）；Co-IP结果显示，SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc存在相互作用。通过PCR扩增获得了带有Flag标签序列的SCRV-N基因的ORF片段，并构建了SCRV-N蛋白过表达载体pcDNA-N-Flag；将pcDNA-N-Flag质粒转染鳜脑组织细胞系（CPB细胞系），荧光共定位结果显示，Sc-c-Myc与SCRV-N在细胞质内存在共定位现象；通过逆转录实时定量PCR（RT-qPCR）和免疫印记（Western blot）检测转染pcDNA-N-Flag的CPB细胞系中Sc-c-Myc及谷氨酰胺代谢通路关键酶（GLS1、GDH和IDH2）的表达变化，发现Sc-c-Myc、GLS1的转录水平和蛋白水平均显著上调。综上表明，SCRV的N蛋白与Sc-c-Myc互作促进Sc-c-Myc的表达，进而调控宿主细胞谷氨酰胺代谢途径，为SCRV防控提供了新的靶点。