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胶孢炭疽菌T-DNA插入突变体库的构建及其分子分析

文献类型: 中文期刊

作者: 黄贵修 1 ; 薛迎春 1 ; 卢昕 1 ;

作者机构: 1.中国热带农业科学院环境与植物保护研究所海南省热带农业有害生物检测监控重点实验室

关键词: 胶孢炭疽菌;T-;DNA;插入突变;PCR;Southern杂交

期刊名称: 热带作物学报

ISSN: 1000-2561

年卷期: 2008 年 29 卷 01 期

页码: 31-36

收录情况: CSCD

摘要: 利用根癌农杆菌介导的T-DNA插入遗传转化体系转化杧果炭疽菌SC2菌株,共获得抗潮霉素B突变体4680个,平均每转化1.0×106个炭疽菌分生孢子可得到300~980个突变体,且潮霉素抗性在多次传代实验中得到稳定遗传。随机挑取38个突变体进行PCR检测,均可扩增出1条约1.2kb的目标谱带,说明突变体为T-DNA插入引起;进一步的Southern blot杂交分析结果表明,在随机挑选的20个突变体中,有1个(5%)为三拷贝T-DNA插入,4个(20%)为双拷贝插入,剩余的15个(75%)为单拷贝插入。

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