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猪miRNA-101真核表达载体的构建及定点突变

文献类型: 中文期刊

作者: 张姣 1 ; 邵思宇 2 ; 李利族 2 ; 汪亮 2 ; 刘娣 2 ; 杨秀芹 2 ;

作者机构: 1.东北农业大学动物科技学院

2.东北农业大学动物科技学院;黑龙江省农业科学院

关键词: 猪;miRNA-101;重叠延伸PCR;定点突变;真核表达载体

期刊名称: 黑龙江畜牧兽医

ISSN: 1004-7034

年卷期: 2015 年 15 期

页码: 18-20

收录情况: 北大核心

摘要: miRNA通过在转录后水平调控靶基因的表达,在机体的生命活动中发挥着重要作用。成熟miRNA 5'端第2~8个核苷酸对其识别、结合靶基因至关重要。笔者的前期研究发现,猪miRNA-101成熟序列5'第5个核苷酸存在着C/A突变。为了研究该突变对miRNA-101功能的影响,试验以pc DNA3.1+为载体骨架,构建了猪miRNA-101基因野生型真核表达载体,并利用重叠延伸PCR法进行定点突变。结果表明:试验成功获得了miRNA-101成熟序列5'端第5个核苷酸突变为A的真核表达载体。

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