文献类型： 中文期刊
作者： 江福能 1 ; 陈冠星 1 ; 梁应科 1 ; 江敏耀 1 ; 叶剑恒 1 ; 刘文华 2 ; 吴永定 3 ; 何慧婵 4 ;
作者机构： 1.广州医科大学附属市一人民医院
2.广东省农业科学院农业生物基因研究中心
3.广州医科大学公共卫生学院
4.广州医科大学第一附属医院
关键词： 受体,雄激素;前列腺增生;前列腺肿瘤;CRISPR/Cas9
期刊名称： 中华生物医学工程杂志
ISSN： 1674-1927
年卷期： 2016 年 22 卷 004 期
页码： 283-286
摘要： 目的探讨细胞水平的雄激素受体(AR)基因敲除方法,为前列腺疾病AR通路的功能研究提供细胞株材料。方法通过在线软件设计针对AR的sgRNA靶向序列,将设计好的sgRNA靶序列克隆到PX330载体中并测序验证。将克隆好的CRISPR?AR载体转染T293细胞,提取DNA,PCR产物酶切和测序鉴定基因敲除效率。结果 CRISPR?AR载体测序证明质粒载体构建成功,293T细胞转染和酶切鉴定实验证明CRISPR?AR载体具有95.3%的敲除效率。结论基于CRISPR/Cas9技术构建的CRISPR?AR载体可用于细胞的AR基因敲除,可进一步构建AR基因敲除的细胞株。
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