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应用重组杆状病毒表达猪瘟病毒糖基化EO(Erns)蛋白

文献类型： 中文期刊

作者： 李文良 1 ; 毛立 1 ; 张纹纹 1 ; 江杰元 1 ;

作者机构： 1.江苏省农业科学院兽医研究所

关键词： 猪瘟病毒;E0;重组杆状病毒;糖基化

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2013 年 45 卷 003 期

页码： 50-53

收录情况： 北大核心

摘要： 通过PCR方法扩增出包含糖基化信号肽的猪瘟兔化弱毒疫苗株E0 (Ems)蛋白基因,末端引入6×His标签序列,将其克隆到Bac-to-Bac杆状病毒表达系统pFastBacTM HT B载体中,将阳性重组质粒pF-E0转化DH10Bac感受态大肠杆菌,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组Bacmid质粒(rBac-E0).转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒rAc-E0.经Western blot鉴定重组蛋白正确表达,且具有良好的抗原性;用糖苷酶PNGase F处理后重组蛋白分子量减小为32 ku,表明重组蛋白为糖基化蛋白.这为进一步研究E0蛋白的功能、亚单位疫苗和诊断试剂的开发奠定了基础.

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