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SELEX技术筛选毒死蜱单链DNA适体

文献类型: 中文期刊

作者: 雷兆静 1 ; 张存政 2 ; 刘媛 2 ; 王丽 1 ; 胡秋辉 1 ; 刘贤进 2 ;

作者机构: 1.南京农业大学食品科技学院

2.江苏省农业科学院食品质量安全检测研究所

关键词: 适体;SELEX;荧光;毒死蜱

期刊名称: 江苏农业学报

ISSN: 1000-4440

年卷期: 2012 年 28 卷 01 期

页码: 198-203

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 试验旨在利用SELEX技术体外筛选毒死蜱的特异性适体。体外合成全长为91 nt的ssDNA文库,以链亲和素修饰的凝胶为载体、毒死蜱为靶分子进行SELEX(配体指数增强系统进化技术)筛选。利用荧光标记法测定适体的筛选效率、亲和力和特异性,通过MFOLD分析软件对亲和力较高的适体进行二级结构预测和结合位点分析。结果表明,经过15轮筛选后,DNA文库的筛选效率达到44.00%;最终获得9条ssDNA适体,其中适体N23对毒死蜱具有最高的亲和力,其结合活性显著高于N23与水胺硫磷、丙溴磷、氧化乐果的结合活性;二级结构表明茎环结构可能是毒死蜱与适体相互作用的结构基础。

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