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鲨鱼弧菌LAMP检测方法的建立

文献类型: 中文期刊

作者: 刘金叶 1 ; 冯娟 1 ; 刘广峰 1 ; 苏友禄 1 ; 徐力文 1 ; 郭志勋 1 ; 王云新 2 ;

作者机构: 1.中国水产科学研究院南海水产研究所/农业部南海渔业资源开发利用重点实验室

2.广东省水生动物疫病预防控制中心

关键词: 鲨鱼弧菌;环介导等温扩增技术;rpoA基因

期刊名称: 广东农业科学

ISSN: 1004-874X

年卷期: 2012 年 39 卷 03 期

页码: 146-149+233

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 采用环介导等温扩增技术(LAMP)成功构建了一种鲨鱼弧菌的检测方法。根据鲨鱼弧菌的rpoA基因序列设计4条引物(内引物F3和B3,外引物FIP和BIP),并对LAMP扩增反应的各物质浓度和反应条件进行优化,确定最佳反应温度为65°C,最佳反应时间为55 min。该法对鲨鱼弧菌纯菌培养物的检测浓度约为2.4×102CFU/mL,结果比PCR法具有相似或更高的灵敏度,而且操作简单,反应后体系变浑浊,肉眼可辨;加入SRYB Gold荧光染料,阳性反应为绿色,阴性对照为浅橘色,更便于观察,有望发展成为快速检测鲨鱼弧菌的一种有效方法。

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[1]养殖大菱鲆腹水病病原菌的分离与鉴定. 景亚运,张正,王印庚,于永翔,廖梅杰,李彬. 2016

[2]1株军曹鱼病原弧菌的鉴定及其系统发育树分析. 郭明元,刘广锋,冯娟. 2006

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